二、茎尖微体嫁接- -| 回首页 | 2005年索引 | - - 二、抗血清(antiserum)鉴定法

病毒植物的鉴定 - -

                                      

病毒植物的鉴定

   从上述途径培育得到的植株,必须经过严格的鉴定,证明确实无病毒存在,才是真正的无病毒苗,才可以提供给生产应用。鉴定的方法有多种。
  
一、指示植物(indicating plant)
  
利用病毒在其他植物上产生的枯斑作为鉴别病毒种类的方法,就是枯斑和空斑的测定法。这种专门选用以产生局部病斑的寄主即为指示植物,又称鉴别寄主。它只能鉴定靠汁液传染的病毒。
  
指示植物法最早是美国的病毒学家Holmes 1929年发现的。他用TMV的普通烟叶的粗汁液和少许金刚砂相混合,然后在烟叶子上摩擦2-3天后叶片上出现了局部坏死斑。在一定范围内,枯班与浸染性病毒的浓度成正比。这种方法条件简单,操作方便,故一直沿用至今,仍为一种经济而有效的鉴定方法。枯班法不能测出病毒总的核蛋白浓度,而只能测出病毒的相对感染力。
 
由于病毒的寄生范围不同,所以应根据不同的病毒选择适合的指示植物。此外还要求所选择的指示植物不但一年四季都容易栽培,并且在较长的时期内还能保持对病毒的敏感性和容易接种,而且在较广的范围内具有同样的反应。指示植物一般有两种类型;一种是接种后产生系统性症状,其病毒可扩展到植物非接种部位,通常没有局部病班;另一种是只产生局部病班,常由坏死、褪绿或环状病班构成。
  
在接种时从被鉴定植物上取1-3克幼叶,在研钵中加10毫升水及少量磷酸缓冲液(PH7),研碎后用两层纱布滤去叶片的渣滓,再在汁液中加入少量的500-600目的金刚砂作为指示植物叶片的摩擦剂,使叶面造成小的伤口,而不破坏表面细胞。以后用棉球蘸取汁液在叶面上轻轻涂抹2-3次进行接种,后用清水冲洗叶面。接种时可用手指涂抹、用纱布或用喷枪等来接种。为确保接种质量接种工作应在防蚜虫温室中进行,保温15-25℃。接种后2-6天可见到上诉症状出现。
  
木本多年生果树植物及草莓等无性繁殖的草本植物,由于采用汁液接种法比较困难,所以通常采用嫁接接种的方法。以指示植物作为砧木,被鉴定植物作接穗,常用劈接法。

- 作者: 老白龙马 2005年05月3日, 星期二 18:20 加入博采

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