三、消毒接种培养
由于花药消毒比较简便，所以应从健壮无病植株中采集花蕾，因为未开放的花蕾中的花药为花被包裹，本身处于无菌状态，可仅用70%酒精棉球将花的表面擦洗即可。也可按对其他器官消毒处理方法进行，先用70%的酒精浸一下后，在饱和漂白粉液中浸10-20分钟，或用0.1%升汞消毒7-10分钟，然后用无菌水洗3-5次。
花药在消毒前，也可进行预处理，将花蕾剪下放入水中，在冰箱4-5℃下保持3-4天。低温储藏后，花药容易发生胚状组织。接种时把花蕾用解剖刀、镊子小心剥开花蕾，取出花药，注意去掉花丝，然后散落接种到培养基上，一个10毫升的试管可接种20个花药。
培养温度在23-28℃左右，每天11-16小时的光照，光照强度2000-4000lx。
脱分化培养时，可用MS+2，4-D的培养基，或N6+2，4-D的培养基，经10-30天，可诱导生成愈伤组织，或少数生成胚状体。愈伤组织增殖到1-3MM左右时，应转移到加有细胞分裂素和微量生长素的新的分化培养基上，再经20-30天，可获花粉植株。
胚状体为类似于胚的组织，它经过原胚、球型胚，然后循着与合子胚相似的发育顺序，即心形胚、鱼形胚、子叶期的顺序继续分化形成小植株。由于此途径避免了经由愈伤组织这一复杂过程，可直接由花粉形成胚状体，免去生根阶段，具有保持遗传稳定性，发育速度快的特点，所以越来越受人们研究的重视。当然胚状体也可由愈伤组织产生。
培养花药是直接产生胚状体还是产生愈伤组织，主要取决于培养基中激素的状况。一种植物的花药可以在一种培养基上长幼苗，而在另一种培养基上则形成愈伤组织。如水稻通常在含有生长素的培养基上诱导出愈伤组织，而在不含任何激素的N6培养基上长出胚状体。但在辣椒的花药培养中，只要培养基合适，甚至可以在同一花药上一部分花粉形成胚状体，而另一部分只形成愈伤组织。
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