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碳水化合物 - -

                                      

碳水化合物

      所有的植物组织培养基都需要有碳水化合物作为能源,但当培养物通过光合作用提供的CO2能足以维持生长时可不在培养基上加碳源,这种情况是很少见的。用作碳源的碳水化合物通常为蔗糖或D-葡萄糖,用量通常为2%-4%,高者可达5%,亦可用市售的白糖所代替,但一般应增加用量,而且最好用比较固定的厂家生产的产品,以保证实验的稳定性。在改用一批新的市售白糖时最好先做预试,以防在大量使用时出现问题,伤害培养材料,造成不必要的损失,因为市售白糖是一种混合物,成分复杂且不稳定。几乎所有的培养物在蔗糖作为碳源时生长都比较好,只有少数植物或组织在葡萄糖或果糖作为碳源的培养基上生长更合适。也有用麦芽糖、半乳糖、甘露醇、山梨醇和乳糖作为碳源的。蔗糖在经高温灭菌后,会发生部分降解,产生D-葡萄糖和D-果糖等,与用过滤法灭菌相比,可能会出现一些不同的实验结果,但这并不说明高温灭菌与过滤灭菌哪一种方式更好。如果要进行比较严格、精确的实验,最好用过滤法灭菌蔗糖,除此之外在大部分情况下可与培养基一起进行高温灭菌。研究表明蔗糖不仅作为碳源影响到培养物的营养状况,而且在某些情况下还会影响到细胞的分化,如在进行叶用莴苣的髓细胞培养时,诱导木质部分化的适宜浓度为2g/L,但要让木质部进一步发育则最好再提高蔗糖浓度,这样才能更有利于木质部的形成。木质部成分的分化,特别是管胞分子的分化形成,往往是器官发生的先决条件。

    蔗糖、葡萄糖、白糖等的纯度问题,现在也引起人们的注意,因为在结晶时,它们往往包藏有恒量的有机物如氨基酸等,这些虽然不会使实验受到很大影响,但有时可能影响到实验结果的分析,在使用时应稍加留神。

    糖的种类和用量是植物组织培养能否成功的重要因素之一。蔗糖的作用具有普遍性和广泛性,这一点已无人怀疑。近年来,其它糖类在植物组织培养中的作用引起很大关注。在淀粉作为凝固剂的培养基中加入12%蜜二糖,比只加8%蔗糖的大麦花粉培养基产生胚状体的频率高35倍,可高达40%。乳糖、麦芽糖、半乳糖和甘油均可显著促进培养的柑橘的胚状体发生。麦芽糖、麦芽浸出物和果糖对苜蓿胚状体发生的促进作用均大于蔗糖。葡萄糖、果糖、甘露糖、核糖和蔗糖对培养的烟草原生质体再生都有促进作用,半乳糖则有抑制作用。麦芽糖可明显提高培养的大麦花药的绿苗产率,而蔗糖、果糖和葡萄糖单独或麦芽糖混合使用,均不利胚状体的生长。

- 作者: 老白龙马 2005年05月3日, 星期二 18:49 加入博采

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