这些体内试验必然受到限制，用含细菌培养物的火绵胶囊悬挂在含普通培养基试验瓶中。这个步骤由Carnot和Fournier在1900年迅速采用以寻找从肺炎球菌扩散毒素；他们报道了与普通培养所需要的如最大的胶囊，延长活性，更高毒力的不同性质。在同年，Ruffer和crendirpoulo叙述一种类似的装置，但只提供了应用的可能性。不久，在1904年Frost利用这个技术研究土壤和水里微生物对伤寒菌的抵抗，此观察现在应叫抗菌作用。那些前驱者应用半透膜培养微生物一种普通的方法包括几个重要的分类。主要的特点是微生物菌群被分离至扩散壁的一侧环境里。在另一侧大的空间含营养物提供代谢和生长。这些营养素通过壁扩散进入培养室，又可扩散代谢产物，从培养处扩散分离产生透析交换。
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